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抑菌圈测定仪配件及用途

1.供校验用的定标圈；

2.备用灯泡两只；

3.技术指标：

（1）单个抑菌圈的直径，仪器重复测量的相对标准误差<0.1%；

（2）旋转定标圈，仪器对其四个方向上的相对标准误差<0.1%；

（3）对同一组检品的效价值，仪器的重复测量误差<1%  。

用途

（1）测定的生物效价（二、三剂量及一剂量）

（2）测定的敏感度（人用或兽用）；

（3）测定的血药浓度，评价新药的***生物利用度；

（4）其他不规则面积的自动测定。

抑菌圈测定仪边缘检测方法介绍 

传统的抑菌圈测量方法是用游标卡尺在培养皿的背面进行手工非接触测量，精度低，主观生大，操作繁琐 。后来出现了利用光学非接触测量法的抑菌圈测量仪，但价格昂贵，测量精度也不十分理想。由于各种因素的影响，基于图像处理测量抑菌圈大小的关键是如何准确地检测到抑菌圈的边缘 。边缘检测算法很多，如灰度图阈值法、跟踪法、小波变换法等，但一般在检测到抑菌圈边缘的同时，还检测到了内部菌落、培养皿本身及其底部气泡和污垢等的边缘，以及琼脂厚度不均匀、溶液置入不当等原因形成的边缘，干扰了对抑菌圈的测量。

不同培养基的体积对抑菌圈的抑菌圈测定仪

（1）接种液准备：按照标准规定，用PBS缓冲液稀释***悬液至1×106cfu/mL～5×106cfu/mL。

（2）培养基准备：分别用移液制备10 mL、15mL、20 mL、25 mL四个不同体积的培养基各6个（3个用于ATCC6538金***，另3个用于8099大肠）。

（3）试样接种：用无菌棉拭子蘸取接种菌液，在平皿的培养基表面均匀涂抹3次，每涂抹1次，平皿转动60°，后将棉拭子绕平皿边缘涂抹一周，盖上盖子，置室温干燥5 min。

（4）贴试样：将试样平贴在培养基上，用无菌镊子轻压试样，使其紧贴培养基表面。每个培养基贴一块试样于中间位置。

（5）培养：倒置平皿，放入生化培养箱中37℃培养16h～18 h。

（6）测量：测出每个平皿中的抑菌圈外沿总宽度及试样总宽度，进而算出抑菌圈宽度，求出平均值。

从试验结果可看出，不同体积的培养基对抑菌圈的影响还是比较大的。培养基体积为10 mL和15 mL时，抑菌圈相差不大，但当培养基增加到20 mL时，抑菌圈骤降，下降率超过20%。总体来说，随着培养基体积的增加，厚度也，但抑菌圈却反而变小。原因可能是体积增大，越多的剂渗透到了培养基底层，从而影响了表面的抑菌圈大小。

抑菌圈测定仪使用方法

孔碟法：在含菌培养基上直接打孔，药液滴于小孔内，通过药剂的扩散而形成大小不同的抑菌圈来比较药剂的毒力。一般是用打孔器在凝固后的培养基平面上打孔，也可将不锈钢杯放于培养皿内，然后在培养皿内倒入含菌培养基液，凝固后取出不锈钢杯，使培养基平面留下小孔。

洋菜柱法：将含有药剂的洋菜柱放于含菌的培养基平面上，因药剂的水平扩散而形成抑菌圈，根据抑菌圈大小不同来比较药剂的毒力。洋菜柱的制作为，将一定浓度的药液与一定量熔化后的培养基混合，放于培养皿内，凝固后用打孔器打取一定大小的洋菜柱即可。